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了解一下GPC分子量測試的分離機(jī)理吧

更新時間:2022-12-06  |  點(diǎn)擊率:1812
  GPC分子量測試(Gel Permeation Chromatography ) ,凝膠滲透色譜,又稱為尺寸排阻色譜(Size Exclusion Chromatography,簡稱SEC),它是基于體積排阻的分離機(jī)理,通過具有分子篩性質(zhì)的固定相,用來分離相對分子質(zhì)量較小的物質(zhì),并且還可以分析分子體積不同、具有相同化學(xué)性質(zhì)的高分子同系物。
 
  目前關(guān)于凝膠滲透色譜的分離機(jī)理存在著以下幾種基本理論:
 
  1.立體排斥理論;
 
  2.有限擴(kuò)散理論;
 
  3.流動分離理論。
 
  除上述理論外,尚有分子熱力學(xué)理論和二次排斥理論等。
 
  由于應(yīng)用立體排斥理論解釋凝膠滲透色譜中的各種分離現(xiàn)象與事實(shí)比較一致,因此立體排斥理論已為人們普遍采用。即:它的分離基礎(chǔ)主要依據(jù)溶液中分子體積(流體力學(xué)體積)的大小來進(jìn)行分離。
 
  凝膠滲透色譜的分離過程是在裝有多孔物質(zhì)為填料的色譜柱中進(jìn)行的,一個填料的顆料含有許多不同尺寸的小孔(這些小孔具有一定的分布),這些小孔對于溶劑分子來說是很大的,它們可以自由地擴(kuò)散出入。
 
  由于高聚物在溶液中以無規(guī)線團(tuán)的形式存在,且高分子線團(tuán)也具有一定的尺寸,當(dāng)填料上的孔洞尺寸與高分子線團(tuán)的尺寸相當(dāng)時,高分子線團(tuán)就向孔洞內(nèi)部擴(kuò)散。
 
  顯然,尺寸大的高聚物分子,由于只能擴(kuò)散到尺寸大的孔洞中,在色譜柱中保留的時間就短;而尺寸小的高聚物分子,幾乎能夠擴(kuò)散到填料的所有的孔洞中,向孔內(nèi)擴(kuò)散的較深,在色譜柱中保留的時間就長。
 
  因此,不同分子量的高聚物分子就按分子量從大到小的次序隨著淋洗液的流出而得到分離。
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